日用化学工业(中英文)

作者：吴亚妮,吕晓帆,王莹,唐寅

单位：上海交通大学 设计学院,上海 200240

关键词：苦水玫瑰精油,黑色素含量,B16黑色素瘤细胞,信号通路,

本文研究苦水玫瑰精油对小鼠B16黑素瘤细胞中黑色素合成的影响,并探讨其作用机制,为苦水玫瑰精油作为天然活性物质的开发应用提供实验依据。采用气相色谱与质谱联用技术（GC-MS）分析苦水玫瑰精油中的挥发性物质成分,研究对象为体外培养的小鼠B16细胞,构建α-黑素细胞刺激素（α-MSH）诱导的黑色素高表达细胞模型;经不同质量浓度的苦水玫瑰精油干预后,对B16细胞进行台盼蓝染色观察,采用CCK8法测定苦水玫瑰精油对黑色素细胞活力的影响;分别采用酶联免疫吸附法（ELISA）和多巴氧化法分析B16细胞中的黑色素含量和酪氨酸酶（Tyr）活性的变化;利用质量浓度为2 g/L的苦水玫瑰精油分别处理B16细胞12,24和48 h,通过实时荧光定量PCR（quantitative Real-time PCR,qRT-PCR）以及蛋白免疫印迹检测（Western blot）实验测定B16细胞内环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate,cAMP）的反应元件结合蛋白（CRE-binding protein,CREB）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAP kinase,p38 MAPK）、细胞外调节蛋白激酶（extracellular signal-regulated kinases,ERK）与小眼畸形相关转录因子（microphthalmia-associated transcription factor,MITF）的表达情况,探究苦水玫瑰精油对黑色素合成途径的影响。qRT-PCR实验结果显示,苦水玫瑰精油处理B16细胞48 h后细胞内MITF基因的表达被显著抑制,MITF基因的表达下调了76%,CREB,p38 MAPK的表达也被显著抑制,其中抑制率分别达到54%,41%,而ERK1与ERK2的表达随时间延长而逐渐升高;Western-blot实验也得到相似结果,CREB,p38 MAPK蛋白与磷酸化表达水平的变化趋势与MITF相一致,随着时间增加表达量随之减少,而ERK蛋白表达水平随着处理时间的增加而逐渐升高。表明苦水玫瑰精油可以通过抑制上述三条信号途径下调MITF的表达,从而减少细胞内黑色素含量。

来源：2022年第3期

《日用化学工业(中英文)》期刊编辑部

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